发明名称：戊型肝炎病毒4型ORF2片段的病毒蛋白颗粒及其制备方法和应用
摘要
本发明涉及一种戊型肝炎病毒的蛋白颗粒，具体的讲，涉及戊型肝炎病毒4型ORF2片段的病毒蛋白颗粒，肝炎病毒蛋白颗粒的重组表达载体、宿主细胞、抗体，肝炎病毒蛋白颗粒、抗体和核苷酸序列的应用，表达方法以及其制备方法和应用。本发明的病毒蛋白颗粒的序列具有SEQ NO：1或SEQ NO：3所示序列中至少477位连续的核苷酸序列。
权利要求
1.一种戊型肝炎病毒4型ORF2片段的病毒蛋白颗粒，其特征在于，所述病毒蛋白颗粒的序列具有SEQ NO：1或SEQ NO：3所示序列中至少477位连续的核苷酸序列。
2.根据权利要求1所述的戊型肝炎病毒4型ORF2片段的病毒蛋白颗粒，其特征在于，所述的病毒蛋白颗粒的序列具有SEQ NO：1或SEQ NO：3所示序列的1～21位为蛋白的N端，497～516位为蛋白的C端。
3.根据权利要求1所述的戊型肝炎病毒4型ORF2片段的病毒蛋白颗粒，其特征在于，所述的病毒蛋白颗粒的序列具有SEQ NO：1或SEQ NO：3所示序列的13～21位为蛋白的N端，508～516位为蛋白的C端。
4.根据权利要求1所述的戊型肝炎病毒4型ORF2片段的病毒蛋白颗粒，其特征在于，所述的病毒蛋白颗粒的序列具有SEQ NO：1或SEQ NO：3所示序列的13位为蛋白的N端，508位为蛋白的C端。
5.一种编码权利要求1所述的戊型肝炎病毒4型ORF2片段的病毒蛋白颗粒的核苷酸序列。
6.根据权利要求5所述的核苷酸序列，其特征在于，所述核苷酸序列具有SEQ NO：2或SEQ NO：4所示的核苷酸序列。
7.一种抗体，其特征在于，所述的抗体对具有权利要求1～4所述的病毒蛋白颗粒有特异性的结合亲和力。
8.一种重组表达载体，其特征在于，所述的重组表达载体含有权利要求5所述的核苷酸序列。
9.一种宿主细胞，其特征在于，所述的宿主细胞含有权利要求8所述的重组表达载体。
10.一种产生免疫原性戊型肝炎病毒4型ORF2片段的病毒蛋白颗粒的方法，其特征在于，所述的方法包括：在适合表达所述病毒蛋白颗粒的条件下，培养权利要求9所述的宿主细胞。
11.权利要求10所述的产生免疫原性戊型肝炎病毒4型ORF2片段的病毒蛋白颗粒的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)PCR扩增得到目的基因，将目的基因片段克隆入pEASY-T3质粒中，并鉴定；
(2)将步骤(1)中的重组质粒克隆至昆虫杆状病毒表达系统的载体pFastBac1中，得到pFastBac1重组质粒，并鉴定；
(3)将步骤(2)中pFastBac1重组质粒感染大肠杆菌DH10Bac感受态细胞，鉴定阳性克隆，分离重组杆粒DNA；
(4)将步骤(3)得到的重组杆粒DNA转染Sf9昆虫细胞，得到重组杆菌病毒。
12.一种用于预防人戊型肝炎的疫苗，其特征在于，所述的疫苗含有权利要求1～4所述的戊型肝炎病毒4型ORF2片段的病毒蛋白颗粒中的至少一种和药学上可接受的载体和/或佐剂。
13.一种用于预防或治疗人戊型肝炎的药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物含有治疗有效量的如权利要求7所述的抗体，以及药学上可接受的载体或赋形剂。
14.一种用于诊断人戊型肝炎的诊断试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒包括权利要求1、5或7所述的病毒蛋白颗粒、核苷酸序列、抗体，以及适用于所述抗原抗体结合反应的检测试剂。
15.权利要求1～4所述的戊型肝炎病毒4型ORF2片段的病毒蛋白颗粒或权利要求7所述抗体在制备诊断、预防或治疗人戊型肝炎的药物中的应用。
16.根据权利要求1所述的戊型肝炎病毒4型ORF2片段的病毒蛋白颗粒，其特征在于，所述的病毒蛋白颗粒在电镜70,000倍下为直径30～40nm的颗粒。