发明名称：乙酰化戊型肝炎病毒衣壳蛋白ORF2及其用途

1.一种分离的乙酰化戊型肝炎病毒开放阅读框2(HEV ORF2)多肽，其特征在于包含肽 序列E(P/L)TVK⁴¹¹LYTSVEN，并在K411位具有乙酰化，

其中所述多肽包含选自以下的序列：

(a)野生型HEV病毒ORF2蛋白的全长序列，优选基因型1-4，更优选基因型1和4的HEV ORF2蛋白的全长序列；

(b)(a)的截短片段，所述片段包含肽序列E(P/L)TVK⁴¹¹LYTSVEN且包含全长ORF2序列的 至少aa125至aa601区域，优选地由氨基酸aa112至aa660区域组成；

(c)(a)或(b)的同源物或变体。

2.权利要求1的分离的乙酰化ORF2多肽，其中所述多肽包含选自SEQ ID NO:1-4的序 列。

3.一种增加权利要求1或2的乙酰化HEV ORF2多肽产生的方法，包括：

-提供包含抑制HDAC6表达的核酸分子的HDAC6敲低细胞，

-用HEV病毒感染所述细胞，或向所述细胞中引入表达所述ORF2多肽的重组表达构建 体，

-培养细胞以产生所述乙酰化HEV ORF2多肽，

其中，相对于HDAC6表达未被敲低的对照细胞，K411乙酰化ORF2多肽在细胞中的产量增 加。

4.权利要求3的方法，其中，步骤(a)的细胞包含抑制HDAC6表达的siRNA或shRNA或其表 达构建体，优选地所述细胞是HDAC6组成型敲低细胞或HDAC6条件性敲低细胞。

5.一种增加权利要求1或2的乙酰化HEV ORF2多肽产生的方法，包括：

-用HEV病毒感染细胞，或向细胞引入表达所述ORF2多肽的重组表达构建体，

-向所述细胞施加HDAC6化学抑制剂以抑制HDAC6活性，

-培养细胞以生产所述乙酰化ORF2多肽，

其中相对于HDAC6活性未被抑制的对照细胞，K411乙酰化ORF2多肽在细胞中的产量增 加。

6.权利要求5的方法，其中HDAC6化学抑制剂选自：非选择性抑制剂如TSA、Vorinostat, LBH589,ITF2357,PXD-101，或HDAC6选择性抑制剂如rocilinostat(ACY-1215)，ACY-241， Tubacin，Tubastatin A(TBSA)，CAY10603，Nexturastat A，HPOB，ACY-738，ACY-775,和ACY- 1083，或其组合。

7.权利要求6的方法，其中使用选自以下的HDAC6抑制剂处理细胞：

(a)浓度0.2μM-5μM，优选1μM的Trichostatin A(TSA)，

(b)浓度1μM-10μM，优选6μM的Tubastatin A(TBSA)，

(c)浓度0.1μM-1μM，优选0.2μM的CAY10603。

8.权利要求3-7的方法，其中收集产生的乙酰化HEV ORF2多肽、或该K411乙酰化HEV ORF2多肽与未乙酰化ORF2多肽的混合物。

9.一种用于生产权利要求1或2的K411乙酰化ORF2多肽的细胞培养物，其包含HDAC6敲 低的细胞，且所述细胞包含编码所述ORF2多肽的核酸。

10.权利要求9的细胞，其中所述细胞被HEV病毒感染。

11.权利要求9的细胞，其中所述细胞包含重组ORF2表达构建体。

12.权利要求9-11的细胞的用途，

(a)用于生产K411乙酰化ORF2多肽；

(b)用于生产病毒；或

(c)用于生产病毒样颗粒。

13.权利要求1或2的分离K411乙酰化ORF2多肽、或根据权利要求8获得的K411乙酰化 ORF2多肽或混合物用于制备免疫组合物或疫苗的用途，或用于制备病毒样颗粒的用途。

14.权利要求1或2的分离K411乙酰化ORF2多肽的多聚体。

15.权利要求1或2的分离K411乙酰化ORF2多肽用于促进ORF2多聚化和/或病毒样颗粒 (VLP)组装的用途。

16.权利要求15的用途，包括将所述乙酰化ORF2多肽加入包含未乙酰化ORF2多肽的VLP 组装溶液中。