假病毒包装基本方法

1. 构建目的病毒的膜蛋白表达质粒，经哺乳动物密码子优化后，插入到载体中。
2. 在转染前一天，将293T细胞调整至5~7x10⁵个细胞/ml的浓度，取15 mL细胞转移至T75细胞培养瓶中，在 37℃、5% CO₂条件下培养箱中过夜培养。

3.1.VSV体系

1. 使用转染试剂将膜蛋白表达质粒转染并同时感染pVSVΔG，4~6h后换液。
2. 在24和48h后收获含有假病毒的细胞上清，用0.45um滤膜过滤后分装并在-80℃保存。

 3.2.HIV体系

1. 使用转染试剂以一定的比例将膜蛋白表达质粒和HIV骨架质粒共转染293T细胞。
2. 在37℃、5% CO₂条件下孵育6小时后，将培养基更换为含10%胎牛血清的新鲜培养基。
3. 48小时后收获含有假病毒的细胞上清，用0.45um滤膜过滤后分装并在-80℃保存。

3.3.MLV体系

1. 使用转染试剂以一定的比例将膜蛋白表达质粒和MLV骨架质粒共转染293T细胞。
2. 在37℃、5% CO2条件下孵育6小时后，将培养基更换为含10%胎牛血清的新鲜培养基。
3. 48小时后收获含有假病毒的细胞上清，用0.45um滤膜过滤后分装并在-80℃保存。