抗体ADE活性评价
参考步骤：
- 将梯度稀释的单克隆抗体与假病毒在细胞培养条件下混合孵育60分钟。
- 将混合后的单克隆抗体与假病毒的混合液加入提前铺好的细胞培养板中，培养24或48小时。
- 通过荧光素酶发光底物检测发光值评价抗体ADE活性。
具体步骤说明：
Step1:假病毒制备。选择HEK293T细胞，铺板至70-80%汇合度。采用Lipofectamine 3000共转染以下质粒：包膜蛋白质粒（SARS-CoV-2 S、VSV-G等），假病毒核心质粒（HIV-1、VSV），报告基因质粒（Luciferase或GFP），37℃，5% CO2培养48小时。
Step2:细胞培养。将Fc受体阳性细胞（THP-1、K562）接种于96孔板，每孔种植约5×104细胞，37℃、5%CO2孵育过夜。
Step3:抗体-假病毒复合物制备。取适量假病毒（100−200TCID50）于无血清培养基中，加入不同浓度的待测抗体。37℃孵育1小时，使抗体与病毒充分结合。
Step4:细胞感染。将抗体-假病毒复合物加入已贴壁的Fc受体阳性细胞，并在37℃孵育24-48小时。
Step5:检测病毒感染效率。荧光素酶报告基因系统检测，细胞裂解后，加入荧光素酶检测试剂。使用微孔板读数仪检测荧光素酶活性（RLU值）。
参考方法示例及文献来源：
1. Wang S, Wang J, Yu X, Jiang W, Chen S, Wang R, Wang M, Jiao S, Yang Y, Wang W, Chen H, Chen B, Gu C, Liu C, Wang A, Wang M, Li G, Guo C, Liu D, Zhang J, Zhang M, Wang L, Gui X. Antibody-dependent enhancement (ADE) of SARS-CoV-2 pseudoviral infection requires FcγRIIB and virus-antibody complex with bivalent interaction. Commun Biol. 2022 Mar 24;5(1):262. doi: 10.1038/s42003-022-03207-0